L’électrophorèse du gel est une technique largement utilisée dans les laboratoires des sciences de la vie pour séparer les macromolécules telles que l’ADN, l’ARN, et les protéines. Dans cette technique, les molécules sont séparées en fonction de la taille et de la charge électrique.
Comment fonctionne l’électrophorèse ?
Le gel utilisé dans l’électrophorèse du gel est généralement fabriqué à partir d’un matériau appelé l’agarose, qui est une substance gélatineuse extraite d’algue marine. Ce gel poreux pouvait être utilisé pour séparer les macromolécules de nombreuses tailles différentes. Le gel est immergé dans une solution tampon de sel dans une chambre d’électrophorèse. Le Tris-borate-EDTA (TBE) est généralement utilisé comme intermédiaire de stockage. Sa fonction principale est de contrôler le pH du système. La caméra a deux électrodes – une positive et une négative – à ses deux extrémités.
Les échantillons qui doivent être analysés sont ensuite chargés dans de minuscules puits dans le gel à l’aide d’une pipette. Une fois que la charge est prête, un courant électrique de 50-150 V est appliqué. Maintenant, les molécules chargées présentes dans l’échantillon commencent à migrer à travers le gel vers les électrodes.
La vitesse à laquelle chaque molécule voyage à travers le gel est appelée sa mobilité électrophorétique et est déterminée principalement par sa charge nette et sa taille. Les molécules fortement chargées se déplacent plus rapidement que faibles chargées.
Une fois que la séparation est complète, le gel est taché avec une teinture pour révéler les bandes de séparation. Le bromure d’éthidium est une coloration fluorescente couramment utilisée dans l’électrophorèse du gel. Le gel est imbibé d’une solution diluée de bromure d’éthidium, puis placé dans un transluminateur ultraviolet pour afficher les bandes de séparation. Les bandes sont examinées ou photographiées immédiatement pour la référence future, car elles diffuseront dans le gel dans un certain délai.
Systèmes de documentation des gels
Notez que l’électrophorèse sur gel est l’un des principaux outils des laboratoires de biologie moléculaire, cellulaire et biochimique. En fait, il reste l’un des principaux soutiens et essais demandés lors de la publication d’importants résultats. C’est pourquoi les chercheurs ont besoin de traiter les gels, des systèmes de haute résolution et de reconnaissance multiple des images. Dans cette optique, le traitement des gels exige la plus grande sensibilité pour assurer la qualité des résultats. ICI
Actuellement, le développement numérique permet de disposer d’analyseurs d’images ou de systèmes de documentation en gel, spécifiquement conçus pour s’adapter aux besoins et au budget du laboratoire. Ils fournissent des solutions innovantes pour la capture et l’analyse des images, et sont configurés sur la base des techniques utilisées par chaque chercheur.
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