Source d’énergie : procédure de base d’électrophorèse

février 24, 2023by Kalstein
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L’électrophorèse est une méthode de base dans le domaine de la biologie moléculaire pour l’analyse (séparation, purification, préparation) des acides nucléiques et des protéines. Le principe de l’électrophorèse consiste en la migration des molécules à travers un gel ou un autre type de matrice de nature poreuse, dans laquelle, par l’action d’un champ électrique, elles seront séparées selon leur taille ou leur poids moléculaire, ceci est réalisé grâce à l’action d’une source d’énergie pour l’électrophorèse.

Il existe deux types d’électrophorèse : l’électrophorèse de type vertical, où les molécules d’ADN et de protéines sont analysées, tandis que l’électrophorèse horizontale fonctionne généralement avec l’ADN ou l’ARN.

La source d’alimentation d’électrophorèse est conçue pour être utilisée dans la séparation d’ADN et d’ARN, RFLP, fragmentation d’ADN, électrophorèse préparative de page (électrophorèse sur gel de polyacrylamide) et séparation de protéines.

La procédure de base de l’électrophorèse

Le procédé comprend une matrice formée d’amidon, d’acrylamide, de papier ou d’une autre substance capable de fournir un support homogène. Sur cette matrice, des échantillons de protéines ou d’acides nucléiques sont placés. L’infiltration des échantillons dans la matrice peut être directe ou à travers des morceaux de papier filtre saturés du mélange de protéines. Le nombre d’échantillons analysés en un seul passage peut varier de 10 à 50 selon le type d’électrophorèse.

La migration et la séparation des acides nucléiques et des protéines solubles dans l’échantillon est réalisée en faisant passer un courant électrique à travers la matrice pendant un certain temps. La séparation et la vitesse de migration dépendent de plusieurs facteurs, tels que, entre autres, la charge électrique des acides aminés qui composent la protéine, le type de matrice et son épaisseur, la force ionique et la composition des solutions tampons. qui sont utilisés pour faire la matrice.

 

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