Un spectrophotomètre est un appareil qui mesure la quantité de lumière absorbée par une substance. Son efficacité, sa résolution, sa sensibilité et sa gamme spectrale dépendront des variables de conception et de la sélection des composants optiques qui le composent. La spectrophotométrie est la mesure quantitative des propriétés de transmission d’un matériau à partir de l’onde lumineuse.

Il est utilisé pour mesurer certains composés d’un médicament afin de s’assurer qu’il est efficace et sans danger pour les consommateurs. Vous pouvez mesurer la croissance bactérienne ou diagnostiquer un patient en fonction de son urine. Il est également utilisé dans l’analyse de l’ADN, de l’ARN et des protéines.

Parties d’un spectrophotomètre

• Source lumineuse: Elle éclaire l’é Il doit répondre aux conditions de stabilité, de directivité, de distribution spectrale continue de l’énergie et de longue durée de vie. Les sources utilisées sont la lampe au tungstène et la lampe à arc au xénon.
• Monochromateur: C’est un dispositif qui permet d’obtenir une lumière monochromatique, et se compose des fentes d’entrée et de sortie, des collimateurs et de l’élément de dispersion. Il isole le rayonnement de la longueur d’onde souhaitée qui est incident ou réfléchi par l’ensemble.
• Photodétecteurs: Dans les instruments modernes, il existe une série de 16 photodétecteurs pour percevoir simultanément le signal dans 16 longueurs d’onde, couvrant le spectre visible.

Utilité des spectrophotomètres

Le spectrophotomètre a la capacité de projeter un faisceau de lumière monochromatique (d’une longueur d’onde particulière) à travers un échantillon et de mesurer la quantité de lumière absorbée par cet échantillon. Cela permet à l’analyste d’effectuer deux fonctions:

Il nous donne des informations sur la nature de la substance dans l’échantillon. C’est parce que chaque substance a un arrangement tridimensionnel particulier d’atomes qui fait que chaque substance a des caractéristiques uniques.

Il nous indique la quantité de substance qui nous intéresse est présente dans l’échantillon. La concentration est proportionnelle à l’absorbance, selon la loi de Beer-Lambert : plus il y a de molécules présentes dans l’échantillon, plus la quantité d’énergie absorbée par leurs électrons est importante. Le spectrophotomètre mesure l’absorbance d’un échantillon dans les spectres de lumière ultraviolette et visible (200 à 850 nm).

Types de spectrophotomètres

Il existe différents types de spectrophotomètres, les caractéristiques les plus remarquables sont mentionnées et détaillées ci-dessous:

• Spectrophotomètre à faisceau unique: la lumière est transportée de l’échantillon au détecteur, une référence est donc nécessaire pour effectuer l’analyse.
• Le spectrophotomètre split beam: La lumière est divisée en deux trajets, celui qui traverse le monochromateur vers l’échantillon puis vers le détecteur, et celui qui passe vers le détecteur qui permet de corriger les variations de la lumière émise par le lampe.
• Spectrophotomètre à double faisceau: Lumière à travers deux chemins dans les compartiments, chacun ayant son propre dé L’un va à l’échantillon et l’autre à la référence.
• Spectrophotomètre d’absorption atomique: Ce type de spectrophotomètre fonctionne en prenant en compte les longueurs d’onde du spectre de rayonnement électromagné Celles-ci sont basées sur le fait que les molécules qui absorbent les fréquences font partie des caractéristiques de sa structure.
• Spectrophotomètre UV visible: L’objectif est de mesurer la lumière qui traverse l’échantillon, pour ensuite la comparer avec son intensité avant qu’elle ne traverse une solution ou un é

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