Un thermocycleur est un équipement utilisé pour les études de biologie moléculaire, qui détecte la fluorescence dans différents canaux d’absorption, avec des méthodes de cycles de température nécessaires pour l’amplification de divers brins d’ADN, dans la technique de la PCR (réaction en chaîne de la polymérase), de sorte que les qualités physico-chimiques des acides nucléiques et des enzymes soient exploitées.

Cette étude en temps réel a été largement utilisée dans divers domaines, tels que la recherche scientifique, la découverte, le diagnostic clinique, les tests de qualité, la sécurité, les applications médico-légales et est actuellement utilisée pour la détection du virus coronavirus.

Caractéristiques du thermocycleur

Par l’automatisation séquentielle des cycles de température, pour réaliser l’étude du PCR en temps réel, ils doivent être développés par des procédés caractéristiques, qui permettent d’obtenir des millions de copies d’un fragment d’ADN donné. Le processus de PCR consiste en la succession d’environ 20 à 30 cycles, après lesquels les nouvelles copies d’ADN se multiplient exponentiellement.

Chaque cycle est subdivisé en 3 phases différentes températures.

• Dénaturation ; la séparation des 2 brins d’ADN en soumettant l’échantillon à des températures d’environ 95 °C et en exposant ainsi chacun des brins à la liaison des amorces et de l’ADN polymérase.
• Hybridation des amorces ; chacun des amorces se liera à sa séquence complémentaire, agissant comme des limites de la région de l’ADN à multiplier. Pour ce faire, la température doit descendre à environ 50-60 °C selon la composition de ces amorces.
• Extension ; l’ADN polymérase commence à synthétiser la nouvelle chaîne d’ADN en prenant comme point de départ chacun des amorces. La température d’extension optimale dépend de la polymérase utilisée et varie généralement entre 75 et 80 °C.

À cet égard, les caractéristiques affirment une plus grande précision et reproductibilité des analyses, qui sont fonctionnelles à une température de 105ºC pour éviter la condensation d’eau dans les couvercles des tubes de réaction, qui pourrait produire une concentration des solutés en modifiant les conditions optimales pour que la réaction soit réalisée.

Fonctions du thermocycleur en temps réel

Fondamentalement, l’équipe offre de nombreux avantages lors de la recherche, qui a à voir avec l’étude des cycles de température ; qui permettent d’amplifier des brins d’ADN en appliquant la méthode PCR, par réaction en chaîne de la polymérase ; qui peuvent synthétiser de nouveaux brins d’ADN en incorporant des nucléotides.

• Détermine les maladies héréditaires directement liées à l’ADN.
• Il supporte l’analyse phylogénétique des animaux, des plantes, entre autres.
• Dans les sciences médico-légales, il récupère des échantillons minimaux d’ADN et établit des liens de parenté.

Son fonctionnement, réside dans la distribution de la température de manière constante dans les délais réglables. Généralement, ils sont manipulés à des températures entre 4 et 90°C ; pour que l’ADN perde ses propriétés naturelles, et puisse séparer les brins nécessaires à l’étude.

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